抑瘤实验每周观察小鼠体内抗体滴度变化,待观察到形成**组织块后隔天检测**体积和小鼠体重。小鼠死亡时取出**组织称重,计算抑瘤率。全文摘要本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种重组人。本发明要克服胃*、胰腺*、食道*以及转移和未转移卵巢*免疫***中手术切除复发率高、化疗和放疗毒副作用强以及单抗***费用高等问题,上海重组人源Claudin18.2蛋白规格齐全。所采用的技术方案是一种重组人,上海重组人源Claudin18.2蛋白规格齐全,上海重组人源Claudin18.2蛋白规格齐全,其序列为HMKSSQYIKANSKFIGEFDQWSTQDLYNNPVTAVFNYQGLWRSCVRESSGFTECRGYFTLLGLPAMLQAV。通过动物实验证实∶10000以上;该抗体可以与人KATOIII和PANC-1肿瘤细胞以及小鼠胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞相结合;该蛋白作为**疫苗可***小鼠体内胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞的生长。文档编号C12N15/70GKSQ8公开日2009年11月25日申请日期2009年4月27日优先权日2009年4月27日公开号8.发明者镭刘。
34%)[23]L-谷氨酸L-glutamicacidUV+DES谷氨酸棒状杆菌Corynebacteriaglutamicum119g/L(folds)[24]琥珀酸SinicacidUV+NTG琥珀酸放线杆菌Actinobacillussinogenesg/L(73%)[25]糖醇SugaralcoholUV+ARTP异常毕赤酵母Pichiaanomalag/L()[26]丙pionicacidUV+LiCl丙酸杆pionibacteriumg/g(25%)[27]核苷虫草素CordycepinUV+HNO2九州虫草Cordycepskyuensisμg/g(folds)[28]木聚糖酶XylanaseUV+NTG+EB曲霉(folds)[29]核酸酶P1NucleaseP160Co-γray桔青霉Penicilliumcitrinum1U/mL(folds)[30]转糖苷酶Transglycosidase60Co-γray尼日尔曲霉AspergillusnigerU/mL(194%)[31]胞外β-葡萄糖苷酶Extracellularβ-glucosidaseUV+Ultrasonic异酒香酵母Brettanomycesanomalus4790U/L(~folds)[32]纤维素酶CellulaseUV灰绿曲霉Aspergillusglaucus70U/mL(~folds)[33]果糖基转移酶FructosyltransferaseUV+LiCl米曲霉Aspergillusoryzae353U/g(folds)[34]纳他霉素NatamycinUV+5-BU褐黄孢链霉菌Streptomcesgilvosporeusg/L(folds)[35]表面活性素SurfactinUV+NTG+Ionbeam解淀粉芽孢杆菌Bacillusamyloliquefaciensmg/L(folds)[36]他克莫司TacrolimusUV+NTG筑波链霉菌Streptomycestsukubaensismg/L。
操作方法20包被先取96孔ELISA板,将(ug/ml),按100nL/孔加入板孔中,4t:包被过夜;倒掉包被液,加入封闭液,室温下封存2h;弃去封闭液,用洗涤液洗6次,每次2min;分别加入倍比稀释的山羊抗人(500ixg/ml)和抗血清,100pL/L,室温下孵育lh;弃去抗体和抗血清,用洗漆液洗6次,每次3min;加入HRP标记的抗山羊二抗,100uL/孔,室温孕育lh;弃去二抗,用洗涤液洗6次,每次3min;加入底物显色液,100uL/L,室温,显色10-20min;加入终止液,50uL/孔,终止反应;酶标仪读数,测定没孔在490nm的吸光值。(3)免疫印迹反应测定血清抗分别取人胃*KATOin和胰腺*PANC-1细胞以及小鼠胃*MFC和胰腺*MPC-83细胞按照,结束后,按Bio-Rad产品说明,凝胶靠近阴极一侧,硝酸纤维膜(NC膜)靠近阳极一侧,置转移缓冲液中(25mmol/LTris、192mmol/LGlycine、20%甲醇),100V恒压lh,将蛋白从凝胶电转移至NC膜上,电转移结束后,取出NC膜,用洗涤液TBST(含mol/LTBS、Tween20)室温洗3次,浸入封闭液(含2%BSA的TBST)中37'C,1h,洗涤液(TOST)室温洗3次,加荷瘤小鼠抗血清,37。C孵育1h,TBST室温洗膜3次,加入兔抗山羊IgG-HRP二抗(中杉公司),37。C孵育lh,TBST室温洗膜3次,再用TBS洗3次。
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