摘要:基因组重排技术是21世纪初发展起来的基于全基因组的定向微生物菌种改良技术.本文介绍了基因组重排技术的原理,并重点概述了基因组重排的具体过程,***对基因组重排技术的发展进行了展望.关键词:基因组重排;递推;原生质体融合;育种;基因组重排技术(genomeuffling)是一种基于整个微生物基因组重排的定向菌种改良技术,2002年,Zhang首先提出基因组重排这一概念:它无须提前知道菌株的代谢途径及基因表达调控机制等遗传背景,直接对微生物进行全基因组重排[1],现在已被视为一种有效的微生物育种方法,江苏工业微生物菌种定向改良实验服务.1、基因组重排原理基因组重排是在传统诱变育种获得突变株后,通过递推式原生质体融合技术,对突变株的原生质体进行基因组重排,将正突变的基因集中在一起,江苏工业微生物菌种定向改良实验服务,从而**提升菌株的正向突变的频率及突变的速率.基因组重排技术一般被用于改良甚至改造微生物的基因,江苏工业微生物菌种定向改良实验服务,从而获得性状更加优良的表型.基因组重排技术与经典的杂交育种技术不同之处在于,后者在每次重排时只有两个亲本,然而基因组重排技术却是两个以上的多亲本杂交,并且通过反复的递推式杂交,从而产生很多表型改良显着的新突变株[1,2,3].2、基因组重排具体方法基因组重排技术通过模拟自然进化过程。
研究内容:鼠伤寒沙门氏菌嘌呤生物合成途径中一个新基因的探索;PurR阻遏蛋白的结构与功能关系的遗传学研究和细菌适应突变研究。
承担课题:国家自然科学基金面上项目"pur调节蛋白的结构和功能关系的遗传学研究"、"嘌呤生物合成途径中一个新基因的探索"和"细菌的适应突变研究"。
研究进展:互补实验和限制性内切酶分析证明purX并非新基因,而是已知基因purG;构建了21种新的PurR阻遏蛋白变体,功能分析表明,PurR蛋白Gln-292氨基酸残基是一个新发现的不可取代的氨基酸;***成功地将purR超阻遏突变用于适应突变研究,并证明在以乳糖为***碳源补加限量腺嘌呤的NCE的非致死的乳糖选择平板上,形成的迟后突变体呈Poisson分布,迟后突变体的产生需要乳糖存在;对适应突变的靶DNA 16bp PUR box的突变谱分析表明与随机突变谱无***差异。
主要成果: 发表论文3篇,其中SCI收录刊物论文1篇。
掌握了野性十足的菌种,还必须有与之配套能够保持菌种野性的发酵培育方法、防止菌种变异办法、菌种提纯办法、防止交叉污染办法和菌种复壮保存办法,可见菌剂的生产工艺也至关重要。良好的生产工艺不仅要比较大限度的保证活菌接种体的数量和活力,还要尽可能保留菌种生长繁殖过程中分泌的次生代谢产物,这两者的结合体才能保证菌种在自然界立于不败之地,才是完整且具野性的合格菌剂。 大凡了解微生物特性的企业负责人和技术人员,都很注重原始菌种的保藏和复壮,同时会花大力气创新菌剂生产工艺,持续保存菌剂产品的野老虎特性。
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