草害是制约农作物产量的主要因子之一。目前,杂草的防治主要依赖化学除草剂,但其对环境的负面影响日益受到人们的关注,减少化学除草剂的使用是未来农业的发展趋势。发展微生物除草剂,实现杂草的生物防治,可以大幅度减少化学除草剂的使用,实现农业的可持续发展。禾长蠕孢稗草专化型(HelhosporiumgramineumRabenh),HGE对稗草的致病力强,对水稻安全,是稗草生物防治的潜力菌。为进一步提高该菌种的孢子产量和代谢产物产量,采用紫外诱变对该菌种进行了改良。两突变菌株均具有良好的遗传稳定性,对水稻、玉米等作物安全。利用RAPD-PCR方法对出发菌株和突变菌株M1和M3进行了分子鉴定,初步说明突变菌株的遗传物质发生了改变。对出发菌株和突变菌株的固体发酵和液体发酵工艺进行了初步研究,确定了相应的比较好发酵条件。其中固体发酵的比较好条件是稗草基质培养基中添加生长因子③,以2菌块/克稗草干物质接种,27℃培养箱中黑暗培养10天。突变菌株M1菌丝体产量的比较好发酵条件组合为:3号培养基,上海肥料微生物菌种定向改良技术服务,初始pH值为7,发酵温度为24℃,上海肥料微生物菌种定向改良技术服务,上海肥料微生物菌种定向改良技术服务,150r/min振荡培养6d;***产量的比较好发酵条件组合为:4号培养基,初始pH值为7,发酵温度为26℃,静置培养14d。
丧失野生环境下竞争存活能力的菌剂,也是如此,根本无法发挥其抵御有害菌群、***土壤有机质等作用。动物园里圈在笼子的老虎现在都叫做“大猫”,已经完全丧失野外生存的本领,把它放出去不是被别人吃掉,而是自己把自己活活饿死。我们每次看到动物园放归野生动物,都要让它适应很长时间的野外生产环境才敢放它归林,这就是为了恢复它的野性,北京八达岭野生动物园的老虎就比较具有野性。掌握了野性十足的菌种,还必须有与之配套能够保持菌种野性的发酵培育方法、防止菌种变异办法、菌种提纯办法、防止交叉污染办法和菌种复壮保存办法,可见菌剂的生产工艺也至关重要。
从常温研磨、蛋白酶K和R nase的加入对传统CTAB法进行改良,并结合试剂盒法,提出了一种***提取高温大曲微生物总DNA的方法。该方法获得的总基因片段大小约21Kb;A260/A280=1.878;A260/A230=1.706;PCR反应***物少,可直接用于16S rDNA的扩增;并通过构建克隆文库技术和变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析后发现高温大曲中细菌多样性丰富,能一定程度上反映微生物群落结构和组成。研究结果表明该方法提取的DNA适用于芝麻香高温大曲中微生物的分子生态学研究。
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