[VIP第1年] 指数:3
细菌，天津冶金微生物菌种定向改良工艺服务、放线菌、古菌和酵母菌为材料开展基础和应用基础研究。基础研究侧重于构建作为基因克隆和表达的遗传系统，尤其是食品级表达的载体与受体系统，研究原核生物基因的时空表达，基因的特异性调控和全局性调控。应用基础研究侧重于研究微生物次生代谢的生物合成途径，提升生产菌的生产能力和获得新的代谢产物；同时采用基因工程和诱变育种等方法，对有应用价值的微生物菌种进行定向改良，天津冶金微生物菌种定向改良工艺服务，天津冶金微生物菌种定向改良工艺服务，以期获得可用于工业化生产的优良基因工程菌株。在分子水平改良酶的结构和功能是对工业微生物菌种传统诱变育种的发展和扬弃。采用ＤＮＡ改组，酶定向进化，分子孵化技术改良产酶编码基因可**提高产酶基因在宿主中的表达，从而提高酶的活力，增加酶的稳定性并产生其它附加功能。
链霉菌分子生物学研究组研究内容：微生物发育分化和微生物次生代谢的分子调控。以链霉菌为模式系统，研究发育分化中基因的时空表达及其作用的分子机制，为揭示生命现象的基本规律提供理论依据。研究微生物次生代谢的生物合成途径及其基因的特异调控和全局调控，为定向改良生产菌的生产能力和获得新的代谢产物提供理论指导。承担课题：国家自然科学基金重点项目"原核生物发育与分化"；国家自然科学基金面上项目"乳酸乳球菌食品级基因克隆表达系统的研究"和"与链霉菌分化有关的调控基因scrX的结构及调控机理研究"；国家杰出青年科学基金"圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇的克隆及序列分析"；国际合作项目"微生物活性物质的生物转化"；中科院重要方向"嗜盐菌遗传转化系列的构建及其应用"。研究进展：研究了与链霉菌发育和分化有关的重要基因-scrX和samR及，该基因的阻断，使链霉菌的发育停止在气生菌丝阶段。samR在链霉菌发育的早期有重要作用，主要在链霉菌从基质菌丝到气生菌丝形成的发育转变中起调控作用。完成了尼可霉素生物合成全部基因簇的DNA序列分析，结果揭示在35kb的DNA序列中含有26个基因，这些基因已送GenBank登录，大部分是未见报道的新基因。
又很多因素会直接影响原生质体制备及再生效果，如微生物的菌龄、制备原生质体的酶种类及浓度、酶解温度及时间、缓冲液及再生培养基的成分与设计等.李亮等[4]在利用基因组重排技术选育红曲霉2-7生产***心血管良药的洛伐他汀时对原生质体制备及再生条件进行了考察，结果表明，当溶壁酶为，菌丝菌龄为66h，在酶解温度为30℃下酶解3h，采用pH为，，原生质体再生率高达.、原生质体递推式融合基因组重排技术是基于原生质体融合技术的多轮递推式融合[5]，此种方式的融合不仅能提高不同遗传特征细胞之间的基因频率，还能进一步提高基因组重排的***性.***轮融合后，筛选出若干株性状比较优良的菌株作为亲本，按照相同的操作方法进行第二轮融合.根据研究人员的原始意图和融合子**终显示的特性，可以实施若干轮融合.原生质体融合的方法主要包括化学法及电诱导融合等方法.化学法是利用聚乙二醇促进融合，如Zhang等[6]建立了一种优化的聚乙二醇介导的原生质体转化系统，用于黑曲霉A20611***生产低聚果糖.电诱导融合法是基于电学和生物化学的理论.在电场作用下，原生质体向电极方向泳动，同时，在细胞内产生偶极化，以促进原生质体的粘附。
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