研究内容:鼠伤寒沙门氏菌嘌呤生物合成途径中一个新基因的探索;PurR阻遏蛋白的结构与功能关系的遗传学研究和细菌适应突变研究,北京能源微生物菌种定向改良工艺服务。
承担课题:国家自然科学基金面上项目"pur调节蛋白的结构和功能关系的遗传学研究"、"嘌呤生物合成途径中一个新基因的探索"和"细菌的适应突变研究"。
研究进展:互补实验和限制性内切酶分析证明purX并非新基因,北京能源微生物菌种定向改良工艺服务,而是已知基因purG;构建了21种新的PurR阻遏蛋白变体,功能分析表明,PurR蛋白Gln-292氨基酸残基是一个新发现的不可取代的氨基酸;***成功地将purR超阻遏突变用于适应突变研究,并证明在以乳糖为***碳源补加限量腺嘌呤的NCE的非致死的乳糖选择平板上,形成的迟后突变体呈Poisson分布,北京能源微生物菌种定向改良工艺服务,迟后突变体的产生需要乳糖存在;对适应突变的靶DNA 16bp PUR box的突变谱分析表明与随机突变谱无***差异。
主要成果: 发表论文3篇,其中SCI收录刊物论文1篇。
自然分离得到的原始菌种远不能达到工业生产要求,通过菌种改良获得高产菌种是有效的手段。传统方法虽然无需了解过多遗传背景就能取得成效,但往往耗时费力。随着DNA重组技术、原生质体融合、组学研究的应用日益***,微生物菌种改良的新方法和新策略诸如代谢工程、基因组改组和系统生物技术、核糖体工程、表观遗传修饰等逐步发展起来。以下综述了近年来菌种改良相关领域方法和策略特别是***报道的表观遗传修饰的***进展。。。。。。。。
又很多因素会直接影响原生质体制备及再生效果,如微生物的菌龄、制备原生质体的酶种类及浓度、酶解温度及时间、缓冲液及再生培养基的成分与设计等.李亮等[4]在利用基因组重排技术选育红曲霉2-7生产***心血管良药的洛伐他汀时对原生质体制备及再生条件进行了考察,结果表明,当溶壁酶为,菌丝菌龄为66h,在酶解温度为30℃下酶解3h,采用pH为,,原生质体再生率高达.、原生质体递推式融合基因组重排技术是基于原生质体融合技术的多轮递推式融合[5],此种方式的融合不仅能提高不同遗传特征细胞之间的基因频率,还能进一步提高基因组重排的***性.***轮融合后,筛选出若干株性状比较优良的菌株作为亲本,按照相同的操作方法进行第二轮融合.根据研究人员的原始意图和融合子**终显示的特性,可以实施若干轮融合.原生质体融合的方法主要包括化学法及电诱导融合等方法.化学法是利用聚乙二醇促进融合,如Zhang等[6]建立了一种优化的聚乙二醇介导的原生质体转化系统,用于黑曲霉A20611***生产低聚果糖.电诱导融合法是基于电学和生物化学的理论.在电场作用下,原生质体向电极方向泳动,同时,在细胞内产生偶极化,以促进原生质体的粘附。
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