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实时荧光定量 PCR 分析优化过程确实需要时间，但是所花的时间是值得的，上海**基因荧光定量PCR实验技术服务。这样得出的分析结果不仅具有比较高的灵敏度和比较大的动态范围，而且准确度高、效率高、重复性好，为实验提供可靠的数据。
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在使用具有相同 ROX 水平的两种预混液的一次检测中获得的原始荧光数据。信号差异是由预混液的成分造成的。使用 Applied Biosystems™ VIC™/MGB 探针在 Applied Biosystems™ 7900HT 快速实时荧光定量 PCR 系统上执行此反应。x 轴显示荧光基团的的发射波长，y 轴显示发射强度。
任何分子的荧光发射都受环境因素的影响，比如溶液的 pH 值和盐浓度。图 2 显示某个 Applied Biosystems™ TaqMan® 探针在两种不同预混液背景下的原始荧光数据。请注意，尽管两组反应的靶标、探针和 ROX 染料浓度都相同，预混液 A 中的荧光强度更高
荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，通过荧光信号不断累积而实现实时监测PCR全程，然后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。在实时荧光定量PCR中，对全程PCR扩增过程进行实时检测，根据反应时间和荧光信号的变化可以绘制成一条曲线
Ct值：C**Cycle，t**threshold，Ct值的含义是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数
荧光背景信号阶段：在荧光背景信号阶段，扩增的荧光信号与背景无法区分，无法判断产物量的变化
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