[VIP第1年] 指数:3
为了在同一张组织切片或细胞学涂片上同时或先后显示两种或两种以上的抗原，发展了双重和多重免疫组化技术。这对于在原位了解不同抗原的关系，将形态与功能相结合极为有用。
近年来，上海六色免疫组化分析服务，上海六色免疫组化分析服务，双重标记技术结合了免疫组化和核酸分子杂交技术，已跨越蛋白质水平，上海六色免疫组化分析服务，进入DNA、RNA水平，可在同一细胞内显示两种不同的DNA或mRNA，或者显示DNA和蛋白质。也有人以放射性同位素标记和酶组织化学结合来显示靶DNA和抗原。双重染色的基本方法有双重荧光和双重酶标记法。双重荧光标记**常用的是FITC和TMRITC或RB200，双重酶标记常用的是辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶。
定位准确、简便、快速、鲜明，在许多领域中仍占有不可取代的地位。如肾活检、皮肤活检中IgG、IgM、IgA、C3等检测，自身抗体的检测，传染病的快速诊断，单克隆抗体的筛选及鉴定等。随着科学技术地不断发展，免疫荧光组织化学技术已经广泛应用于生命科学的各个领域，放射出更加五彩缤纷的荧光。参考文献（1）AkivoshiKawamura,.（2）王伯沄.免疫荧光组织化学和荧光组织化学技术.第四军医大学科技资料增刊,1974;2:5-30.（3）.（4）WickG,TraillKN,.（5）.（6）蔡文琴,王伯沄主编.实用免疫细胞化学.成都：四川科技出版社1990，P968-977.（7）李成文.现代免疫化学技术.上海:上海科技出版社1992；P97-100.（8）Mahmudi-A3er-s,Lacy-P,Bablit2-B,(1-2):113-119.（9）Magro-C-M,(9):543-552.（10）(4):286-298.（11）GregoniWeber,(1):419-422.（12）SavigeJA,PaspaliansB,SilvestriniR,(ANCA)(18):568-571.（13）BallouB,FisherGW,DengJS,(3):251-257.（14）GruberHJ,HahnCD,KadaG,(5):696-704.（15）SouthweelBR,(5):1140-1151.（16）ArsenievL,PickerdN,GoudevaL,(5):547-559.（17）O'BrjenTE,MetheneyCD,(TIGR)proteinintrabecularmeshworkandschlemm'(6):517.（18）HuangMC。
【多色免疫组化染色样本要求】1福尔马林固定的蜡块或玻片，大块组织或TMA都可以，封蜡不能有明显的破损。2玻片样本，组织需要紧贴玻片，避免褶皱，玻片不能有破损、划伤或污渍。3组织**小应包含大于1000个细胞。4蜡块需包埋实体瘤组织，坏死瘤组织、细针穿刺物、细胞甩片样品会影响染色效果。5组织应当用10%中性福尔马林固定，正常固定时间为18～24小时。6切片厚度为4μm左右，使用防脱玻片。建议玻片在固定后一周内制备为佳。7不要在水浴捞片环节添加任何粘合剂，样本应置于玻片正面、**。将捞片竖直置于吸水纸上去除水分，轻敲去除水滴，不要用纸擦拭玻片。8玻片置于45°C热盘上放置30min（自然风干玻片时长不小于1小时）。【设备耗材】1检验所需设备器材：荧光显微镜、通风橱、移液器、恒温干燥箱、微波炉、计时器2检测所需耗材器皿：免疫组化笔、微波修复杯、染色缸、孵育湿盒、盖玻片、洗瓶、量筒100ml、量筒1000ml等【试剂制备】1通用试剂：DMSO、miejun去离子水、二甲苯、乙醇（全部、95%、70%）、10%中性福尔马林、抗原修复液（推荐使用佰诺全景酸性或碱性抗原修复液）、一抗封闭液等。
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