数字PCR(也可称单分子PCR) 一般包括两部分内容,即PCR扩增和荧光信号分析。在PCR 扩增阶段,与传统技术不同,数字PCR一般需要将样品稀释到单分子水平,并平均分配到几十至几万个单元中进行反应。不同于qPCR 对每个循环进行实时荧光测定的方法,数字 PCR 技术是在扩增结束后对每个反应单元的荧光信号进行采集。通过直接计数或泊松分布公式计算得到样品的原始浓度或含量。 目前主流的样本分散方式有两种:以Thermo QuantStudio™ 3D数字PCR系统为**的微流控芯片法、以及以BIO-RADQX200™数字PCR系统为**的微滴法。QuantStudio™ 3D采用了高密度的纳升流控芯片技术,芯片中有多达20,000个反应孔,杭州标准数字PCR检测,样品加样之后,杭州标准数字PCR检测,杭州标准数字PCR检测,会均匀分布到这些孔中,达到相互隔离的目的,PCR反应之后,计数器会读取每个微孔中得到荧光信号并计数。
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常用体液来源(如血液,胸腹水,唾液及尿液等)的待检标本中的DNA,有正常脱落体细胞和病变脱落细胞两种来源,前者的量远大于后者。通过数字PCR微液滴处理能在每个微液滴中有效减少正常体细胞DNA的干扰,实现**标记物的有效检测,如EGFR,ALK,ROS1,KRAS、BRAF等基因的突变检测、乳腺*/胃*的HER2基因扩增检测等,应用于**精确医学的伴随诊断。使用数字PCR技术对患者过程中的循环**DNA(ctDNA)进行检测,实时监控疾病进展。在非小细胞肺*、乳腺*和肠*等多种**患者中都取得了令人鼓舞的结果。与影像学及其他常规指标相比,ctDNA突变及丰度改变通常会提前数月出现,这样就可以提醒医生及时调整医疗方案,使患者得到更有效的改善。
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