蛋白和多糖污染可能的原因如下:
样品中蛋白和多糖含量高,建议加入氯仿之前先高速离心去除蛋白和多糖。
吸取上层无色水相时不小心吸入一些中间蛋白层的物质,建议将移液***头中的液体放回分层的离心管中,重新进行离心后再小心吸取上层水相即可。
样品量太大,裂解不完全也会导致 RNA 样品中蛋白和多糖污染。
A260/A280 的比值低于 1.65
可能的原因如下:1,天津9分钟完成RNA提取试剂盒500T/5865元、RNA 样品溶于 TE 溶液,低离子浓度和低 pH 条件下,A280 的数值会较高, 导致比值低,天津9分钟完成RNA提取试剂盒500T/5865元。
样品匀浆时加的 Trizol 试剂量太少。
匀浆后样品未在室温放置 5 分钟,天津9分钟完成RNA提取试剂盒500T/5865元,会导致蛋白的析出不完全,也会增加 A280的数值。
***得到的 RNA 沉淀溶解不完全。
RNA 降解可能的原因如下:
组织取出后没有马上进行处理或冷冻,导致 RNase 的释放降解样品中的RNA。
贴壁细胞在胰蛋白酶处理时被破坏。
样本量太大而加入的 Trizol 液少,导致裂解不完全,不能有效*** RNase的活性,进而导致 RNA 降解。
提取过程中使用的溶液、离心管或***头未经 RNase 去除处理。
RNA 沉淀没有保存于-80°C。
RNA 电泳时的电泳液及电泳槽中含有 RNase,或者电泳时电泳液温度过高, 造成 RNA 样品被降解。
样品中蛋白和多糖含量高,建议加入氯仿之前先高速离心去除蛋白和多糖。
别名总RNA提取试剂盒英文名称Total RNA Extraction Kit储存条件2-8℃,避光,有效期1年单位盒
货号:R1200
规格:50T/100T
产品内容:试剂盒组成R1200-50R1200-100保存有效期裂解液50ml100ml2-8℃一年漂洗液15ml30mlRT一年洗柱液50ml100mlRT一年RNase free ddH2O15ml30mlRT一年RNase free吸附柱50个100个RT一年RNase free收集管(2ml)50个100个RT一年
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