[VIP第1年] 指数:3
缓慢加入0.5 倍体积无水乙醇，混匀(此时可能会出现沉淀)。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，若一次不能将全部溶液和混合物加入纯化柱，天津新手RNA提取试剂盒50T/690元，请分两次转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃掉收集管中的废液。
向纯化柱中加入500 μl 溶液 RPI(使用前请先检查是否已加入乙醇)，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。
向纯化柱中加入500 μl 溶液 RW(使用前请先检查是否已加入乙醇)，室温静置2 min，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。
向纯化柱 中加入500 μl 溶液 RW，室温静置2 分钟，4℃ 12,000 rpm(~13，天津新手RNA提取试剂盒50T/690元,400×g)离心30 s，去除残余液体。
将纯化柱入2ml 收集管中，天津新手RNA提取试剂盒50T/690元，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min，去除残余液体。
向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。
12000rpm离心2min，弃掉收集管，将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
将吸附柱放入新管中，向膜**滴加50-100ul RNase free ddH2O，室温放置5min，12000rpm室温离心2min即得到RNA
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
按照每毫升**初的 Trizol 加入 1 ml 75%乙醇（DEPC 水配制）的比例，Vortex混匀或颠倒混匀，让沉淀悬浮起来以充分洗涤沉淀中的盐分。
9、4°C，12000rpm 离心 5 分钟，弃上清。剩余的少量液体再用离心机瞬甩一下， 彻底去掉上清液。注意不要吸到沉淀，否则会造成 RNA 损失。
10、室温放置空气干燥 5-10 分钟，待 RNA 沉淀略干后，加入适量（约 20-100µl）的 RNase-free 水溶解 RNA 沉淀，-80°C 冻存。【注】切勿让 RNA 彻底干燥，否则将导致 RNA 溶解度降低。
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