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样品处理

组织：将组织在液氮中磨碎。每 50–100 mg 组织加1 ml 溶液 RL，用匀浆仪进行匀浆处理，上海9分钟完成RNA提取试剂盒信赖推荐。样品体积不应超过裂解液RZ 体积的十分之一。

 单层培养细胞：直接在培养板中加入裂解液RZ 裂解细胞，每10 cm2 面积加1 ml溶液 RL。用取样器抽打几次。

注意：溶液 RL 的加入量根据培养瓶面积决定，不是由细胞数决定。如果加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染，上海9分钟完成RNA提取试剂盒信赖推荐。

 细胞悬液：离心取细胞，弃上清。每5–10×106 动物细胞和植物细胞加入1 ml 溶液 RL，上海9分钟完成RNA提取试剂盒信赖推荐。加溶液 RL 前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。

将匀浆样品在15–30℃放置5 min，使得核酸蛋白复合物完全分离。

RNA试剂盒所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA不纯，需电泳检测。使用时一定要根据自己的实验需要购买**提取试剂盒， 如果不是**试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性，会影响RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析、分子克隆等后续实验的结果。

RNA试剂盒 用于各种植物、动物、微生物的RNA提取，在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂，非常方便，适合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、纯度高，可用于分子生物学后实验。但较好的试剂盒价格比较贵，在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用

（以离心柱型为例）：一般包括：成分数量储藏温度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100个RT一年RNasefree收集管(2ml)100个RT一年此外，还配有一份试剂盒使用说明书，根据不同的生产商，可能还配有不同的试剂，如：DNA酶、溶菌酶等。

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