更重要的该文献还给出了如何规范定量PCR流程的checklist,其**目的就是在规范的实验流程、统一的设计思路下,北京**早期判断数字PCR,得到的结果才具有可重复性,也具有可比性,北京**早期判断数字PCR。但依赖于Cq值仍然是目前定量PCR比较大的技术瓶颈,在这个意义上所谓的“定量”也只是相对的。而且在低拷贝靶分子,北京**早期判断数字PCR、模板浓度差异细微的条件下,其检测的灵敏度、精确度都受到了限制。1999年霍普金斯大学的Bert Vogelstein教授以 Digital PCR为题发表的文章被视为**早的采用数字PCR概念进行研究的文献。
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由于绝大部分微液滴中只含单个或不含模板分子,使得低丰度DNA模板分子的扩增不受高丰度模板分子扩增的竞争,与此同时,样品中可能存在的抑剂也在分配到微液滴的过程中进行了相对稀释,作用于单个微液滴内模板扩增的抑剂数量大幅降低,从而提高PCR扩增对抑剂的耐受程度,因此可应用于诸多临床样品(如血液、尿液、粪便、痰液、胸腹水、脑脊液等)中低丰度痕量核酸标记物的检测。 作为表观遗传学研究中重要的一个研究方向——甲基化程度分析,现阶段有不同的方法或技术来进行研究:如传统的克隆测序法、抗体检测法、定量PCR检测法等受限于方法学的问题,不能获得甲基化程度的精确定量,而数字PCR系统通过对样品的微液滴处理及目标分子的拷贝数定量,为甲基化程度的精确定量检测提供了一种可靠的技术。
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