数字PCR由于检测时完全不依赖传统的Ct值即可实现真正意义上的精确定量,因而可以提供比实时荧光定量PCR更精确的基因差异表达研究,尤其对于那些靶基因表达差异微小的情况,如:mRNA、microRNA、lncRNAs等的表达分析;等位基因的不平衡表达;单细胞基因表达分析;外泌体核酸分子定量分析等。数字PCR微滴化的样品处理及检测,这种摆脱Ct值的计算方法而直接获取目标基因的精确拷贝数,上海分子标志物数字PCR,为拷贝数变异的研究提供了精确的检测精度。是其他诸如二代测序,上海分子标志物数字PCR,上海分子标志物数字PCR、芯片杂交等平台无法达到的。采用数字PCR能够有效对二代测序(NGS)和微阵列比较基因组杂交(aCGH)等实验结果进行验证,并具有检测周期短、成本低、样本通量高等特点可用于拷贝数变异(CNV)研究。
DNase I footprinting是一种精确测定DNA结合蛋白在DNA分子上的结合位点的方法。凝胶阻滞实验(EMSA)和DNase I足迹分析实验是目前两种常用体外研究核酸与蛋白相互作用的方法,凝胶阻滞实验可以确定转录因子是否与DNA直接结合,而DNase I足迹分析实验则可以精确鉴定其结合的DNA序列,从而帮助我们研究基因转录调控的机制。本技术服务利用荧光标记法结合测序的方法来进行DNase I足迹分析实验。检测灵敏高,获得的保护区域清晰,图片的质量好。
数字PCR是一种核酸分子***定量技术。当前核酸分子的定量有三种方法,光度法基于核酸分子的吸光度来定量;实时荧光定量PCR(Real Time PCR)基于Ct值,Ct值就是指可以检测到荧光值对应的循环数;数字PCR是***的定量技术,基于单分子PCR方法来进行计数的核酸定量,是一种***定量的方法。主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法,将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中,每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。
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