[VIP第1年] 指数:3
实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）指的是在PCR进行的同时，对其过程进行监测的能力（即实时）。因此，数据可在PCR扩增过程中，北京临床疾病荧光定量PCR课题承包，北京临床疾病荧光定量PCR课题承包，而非PCR结束之后，进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了**性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中，反应以循环中***检测到目标扩增的时间点为特征，而非在一定循环数后目标分子累计的扩增量，北京临床疾病荧光定量PCR课题承包。目标核酸的起始拷贝数越高，则会越快观察到荧光的***增加。相反，终点法检测（也称 “读板检测”）测量的是PCR循环结束时累计的PCR产物量。
使用可高压处理的移液器，由于移液器容易受产物气溶胶或标本 DNA 的污染，因此要使用可高压处理的移液器 。严格按照试验的分区进行操作，按照提取区、扩增区、检测区单方向流动，物品、样品和试剂不可逆向流动 。操作多份样品时，制备反应混合液，先将荧光 PCR 反应液、荧光探针和酶混合好，然后分装到每个 PCR 管中，这样即可以减少操作次数，避免污染，又可以增加反应的精确度 。加样品、加蛋白酶 K 和加样品过程中，特别注意防止样品的交叉污染和酶的降解 。操作时设立阴性及阳性对照，可验证荧光 PCR反应的准确性和可信性
用于病原体检测：常规PCR不能定量，在操作中易污染导致出现假阳性结果，应用实时荧光定量PCR技术可以解决这些问题。此项技术已应用于检测丙肝***、宫颈*及其*前病变有关的人类**瘤***、抗结核******后定量检测病人痰样本病原体DNA含量，为疾病的诊断和***提供依据。用此项技术还可以一次性检测大量大肠杆菌样本，简便准确，是食品检面的一个突破
用于***选择和疗效判断：化疗过程中主要问题是病人对化疗***的耐药，检测**耐药基因的表达水平是选择化疗***的依据。检测微小残留病变的变化情况对于调整***策略和对病人进行个体化***非常重要
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