数字PCR是一种新开发的,基于荧光定量PCR技术的核酸分子精确定量技术,和传统荧光定量PCR相比,具有更高的灵敏度和准确性,被行业认为是支持液体活检的**有潜力的技术之一。2016年Markets
and Markets发布报告指出,去年全球dPCR和qPCR市场规模为32.8亿美元,2021
年预计达到49.4亿美元,除了北美和欧洲占据主要市场份额,中国、日本、印度等亚太地区的市场增速**快。
数字PCR基于分液方式的不同,数字PCR主要分为:微流体数字PCR(Microfluidic digital PCR,合肥专业数字PCR检测服务,mdPCR),合肥专业数字PCR检测服务、微滴数字PCR(Droplet digital PCR,合肥专业数字PCR检测服务,ddPCR)和芯片数字PCR(Chip digital PCR,cdPCR)。全自动定量Western系统自动上样 ,电泳分离、抗体孵育、化学发光、数据分析,可相对定量分析也可***定量分析。无需制胶、无需转膜、 重复性好、真正定量、 快速灵敏, 所需的样本量极少(样品量只需3-5ul),整个实验的时间很短(只需把样本、一抗等试剂加入微孔板中,3个小时左右出具检测结果),即使在不同实验室,不同的实验操作者,得到的结果一致性也很好(每种靶蛋白的CV值不超过10%),检测灵敏度高(可检测低至pg级),无需转膜可检测大分子量蛋白(蛋白分子量可达400KD),数据***:自动输出目标蛋白的分子量、峰面积、蛋白浓度等分析数据,印迹图片清晰美观。
根据样品稀释分配方式不同,dPCR 技术可以分为三大类,一个是基于大规模集成微流控芯片(a),微反应室/孔板(b)和微滴式(c)。
目前市场上常见的2款dPCR仪器QuantStudio 3D 和QX200分别是基于微反应室(b)和微滴式(c)技术开发的,两者在检测参数上略微有些差异
此外,两者各自都有一些优缺点,比如,QuantStudio 3D运行需要ThermoFisher配套的芯片,但试剂可以通用;QX200运行不需要芯片但是需要Bio-Rad配套试剂;QX200 需要多次移液操作,容易产生是微滴融合,QuantStudio 3D一次只能加载一张芯片,操作相对繁琐等
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