[VIP第1年] 指数:3
向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。
向吸附柱中加入600ul漂洗液，2-8 12,000 rpm ℃ 离心2min，弃废液。
12000rpm离心2min，弃掉收集管，北京9分钟完成RNA提取试剂盒****，将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。
将吸附柱放入新管中，向膜**滴加50-100ul RNase free ddH2O，北京9分钟完成RNA提取试剂盒****，室温放置5min，北京9分钟完成RNA提取试剂盒****，12000rpm室温离心2min即得到RNA
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品，操作过程要小心，带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
SimplyP 总RNA提取试剂
把总RNA提取速度提高3倍，*9分钟内完成！
产品特点：
1.速度快：9分钟内可获得RNA。
2.步骤少：4步即可完成。
3.操作简单：SimplyP试剂盒内只有四种试剂，*需经过裂解、吸附过滤、洗涤、洗脱即可，提纯整个操作过程简单易行，且提取的RNA质量不受操作者熟练程度的影响。
4.适用范围广：可用于组织、全血、体液、骨髓、细胞等样品，且试剂盒中有可彻底灭活病原体的试剂，对于具有潜在传染性的临床样本RNA的提取，有安全、可靠、不产生交叉污染的特殊优势。
5.保质期长：由于本试剂盒采用的裂解液是中性的，没有腐蚀性，且不易变质，使得该试剂盒可室温保存两年。 北京9分钟完成RNA提取试剂盒****对精度要求不高的实验没有必要购买，当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高。
可选步骤： 4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 离心5分钟，取上清，转入一个新的无RNase 的离心管中。
注意：如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可加此步骤离心去除。离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，RNA存在于上清溶液中。
加入200 μl 氯仿，盖好管盖，剧烈振荡15 s，室温放置3 min。
4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 离心10 min，样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA 主要在水相中，水相的体积约为所用溶液 RL试剂的60%。把水相转移到新管中，进行下一步操作。***次使用前应在溶液 RPI、溶液 RW中加入无水乙醇，加入量请参见瓶上标签。
RNA提取注意事项（2）
使用正确的细胞或组织储存条件
在样品用液氮瞬间冻结之后，应该储存在-80°C，千万不能解冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻，也会导致RNA的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在**温条件下先研磨成粉，然后置于裂解液中进行匀浆。 RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNA保护试剂中的细胞或组织可在室温下稳定保存长达1个星期，在4°C可稳定保存长达1个月，或长久保存在-20°C。具体参数请看相关保护试剂说明书。 也是压在国内企业和患者身上的三座大山，导致国内基因检测企业运转效率低、盈利难、竞争激烈。
RNA 完整性检测
取 1 µl RNA 加入适当 RNA loading buffer，混匀，进行电泳检测。若出现清晰的三条带，分别为 28S、18S 和 5S，且条带之间界限清晰，就证明 RNA 样品的完整性非常好。可参考以下图示：
RNA 纯度检测
利用分光光度计或者NanoDrop 仪检测RNA 样品在260nm、280nm 处的OD 值， 并计算 A260/A280 的比值。纯的 RNA 的比值应在 2.0 左右。
提取到的 RNA 得率很低。可能的原因如下：
样品裂解或匀浆处理不彻底。
RNA 沉淀条件和时间太短，没有充分沉淀 RNA 造成 RNA 损失。
***得到的 RNA 沉淀未完全溶解。
订货周期长的问题（如果碰上国内无货的时候，要从国外发货，会等很长一段时间）。上海快速RNA提取试剂盒****
医生或实验室人员收到样本后，对样本进行去除杂质、破碎、建库等一系列操作），再进行上机测序。北京9分钟完成RNA提取试剂盒****
RNA试剂盒 用于各种植物、动物、微生物的RNA提取，在每个试剂盒里都有一份说明使用说明书。实验者只需要按照说明书上的步骤操作即可。使用时无需配制其它试剂，非常方便，适合于RNA的快速提取。所提取的RNA完整性好、纯度高，可用于分子生物学后实验。但较好的试剂盒价格比较贵，在实验室可以根据自己的实验需要来定夺试剂盒的使用
（以离心柱型为例）：一般包括：成分数量储藏温度有效期裂解液100ml2-8℃一年漂洗液30mlRT一年洗柱液100mlRT一年RNasefreeddH2O30mlRT一年RNasefree吸附柱100个RT一年RNasefree收集管(2ml)100个RT一年此外，还配有一份试剂盒使用说明书，根据不同的生产商，可能还配有不同的试剂，如：DNA酶、溶菌酶等。 北京9分钟完成RNA提取试剂盒****
上海朝瑞生物科技有限公司坐落上海市松江区广富林路697号昂立大厦2113室，交通便利，环境优美，是一家服务型企业。是一家有限责任公司企业，随着市场的发展和生产的需求，与多家企业合作研究，在原有产品的基础上经过不断改进，追求新型，在强化内部管理，完善结构调整的同时，优良的质量、合理的价格、完善的服务，在业界受到宽泛好评。公司目前拥有优异员工5~10人人，具有[ "科研技术服务", "应用技术服务", "科研成果转化", "科学产品销售" ]等多项业务。上海朝瑞科技将以真诚的服务、创新的理念、***的产品，为彼此赢得全新的未来！
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